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熱門檢測 | 植物內源激素檢測

動/植物理化檢測

植物內源激素是調控植物生長發育、響應環境變化的關鍵因子。通過對植物內源激素的深入研究和應用，可以推動植物科學的發展，促進農業生產的可持續性，以及生態環境的保護和修復。

生長發育調控：植物內源激素（如生長素、赤霉素、細胞分裂素、脫落酸、乙烯和油菜素內酯等）在植物生長發育的各個階段起著關鍵的調節作用，包括種子萌發、根系生長、葉片擴展、開花結實、衰老脫落等。通過檢測內源激素水平，可以深入了解激素如何影響這些生理過程，為作物生長調節和提高產量提供理論依據。

逆境適應性研究：植物在遭受干旱、鹽堿、低溫、病蟲害等逆境時，會通過調節內源激素平衡來增強自身的抗逆性。檢測植物激素的變化，可以幫助科研人員揭示植物逆境應答的分子機制，為培育抗逆性強的作物品種提供方向。

果實成熟與保鮮：植物激素如乙烯在果實成熟過程中起主導作用，其含量的變化直接影響果實的成熟度和保鮮期。通過監測果實中乙烯及其他相關激素的動態變化，可以合理安排采收時機，優化采后處理和儲存條件，延長貨架期，提高農產品的市場競爭力。

分子生物學研究：植物內源激素的檢測與分析是現代分子生物學研究的重要工具之一，有助于揭示激素合成途徑、信號轉導機制及激素間相互作用的復雜網絡，推動基因功能研究、遺傳改良和作物分子設計育種的進展。

環境監測與修復：植物內源激素的變化也可以作為環境監測的指標，反映土壤污染、重金屬脅迫等環境問題。此外，通過調節植物內源激素水平，可以增強植物的修復能力，用于環境修復項目，如重金屬超富集植物的篩選和應用。

指標		方法	樣品	用量/g
生長素	吲哚乙酸IAA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
生長素	吲哚丁酸IBA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
細胞分裂素	反式玉米素tZ	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	順式玉米素核苷cZR	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	異戊烯基腺嘌呤iP	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	異戊烯基腺嘌呤核苷iPR	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	二氫玉米素DZ	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	二氫玉米素核苷DZR	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	激動素6-KT	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
	6-芐基腺嘌呤（6-BA）	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
赤霉素	GA1、GA3、GA4、GA7等	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
脫落酸	ABA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
水楊酸	水楊酸SA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
水楊酸	水楊酸甲酯MeSA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
茉莉酸	茉莉酸JA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
茉莉酸	茉莉酸甲酯MeJA	液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
赤霉素（GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53）、脫落酸ABA、脫落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水楊酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-（吲哚-3-乙酰）-L-天冬氨酸IAAsp、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-苯丙氨酸IAPhe、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-異亮氨酸IAILeu、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-丙氨酸IAAla、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-色氨酸IATrp、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-纈氨酸IAVal、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-亮氨酸IALeu		液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
6-芐基腺嘌呤6-BA、異戊烯基腺嘌呤iP、異戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-（異戊二烯基）腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-（異戊二烯基）腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、順式玉米素cZ、順式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氫玉米素DZ、7-β-葡糖基二氫玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氫玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氫玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氫玉米素DZROG		液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
褪黑素MT		液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
		高效液相色譜法	鮮樣，-80℃避光	動物 0.2
		高效液相色譜法	鮮樣，-80℃避光	植物 10
油菜素內酯BRs（BL、CS、6DCS、28-HomoBL）		高效液相色譜法	鮮樣，-80℃避光	2
1-氨基環丙烷-1-羧酸（ACC）		液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	1
乙烯		氣相色譜法	鮮樣，-80℃避光	10
獨腳金內酯（5-脫氧獨腳金醇、獨腳金醇、Strigolactone GR24）		液相色譜-串聯質譜法	鮮樣，-80℃避光	2

指標		標準
生長素	吲哚乙酸IAA	Pan, XQ, Welti, et al. Quantitative analysis of major plant hormones in crude plant extracts by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry
生長素	吲哚丁酸IBA
細胞分裂素	反式玉米素tZ
	順式玉米素核苷cZR
	異戊烯基腺嘌呤iP
	異戊烯基腺嘌呤核苷iPR
	二氫玉米素DZ
	二氫玉米素核苷DZR
	激動素6-KT
	6-芐基腺嘌呤（6-BA）
赤霉素	GA1、GA3、GA4、GA7等
脫落酸	ABA
水楊酸	水楊酸SA
水楊酸	水楊酸甲酯MeSA
茉莉酸	茉莉酸JA
茉莉酸	茉莉酸甲酯MeJA
赤霉素（GA1、GA3、GA4、GA5、GA7、GA8、GA9、GA12、GA20、GA24、GA44、GA53）、脫落酸ABA、脫落酸-β-葡糖基酯ABAGE、茉莉酸JA、水楊酸SA、吲哚-3-乙酸IAA、吲哚-3-丁酸IBA、N-（吲哚-3-乙酰）-L-天冬氨酸IAAsp、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-苯丙氨酸IAPhe、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-異亮氨酸IAILeu、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-丙氨酸IAAla、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-色氨酸IATrp、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-纈氨酸IAVal、N-（羥吲哚-3-乙酰）-L-亮氨酸IALeu		NY/T 2871-2015 水稻中43種植物激素的測定液相色譜-串聯質譜法
6-芐基腺嘌呤6-BA、異戊烯基腺嘌呤iP、異戊烯基腺嘌呤核苷iPR、7-β-葡糖基-6-（異戊二烯基）腺嘌呤iP7G、9-β-葡糖基-6-（異戊二烯基）腺嘌呤iP9G、反式玉米素tZ、反式玉米素核苷tZR、順式玉米素cZ、順式玉米素核苷cZR、反式-7-β-葡糖基玉米素tZ7G、反式-9-β-葡糖基玉米素tZ9G、反式-O-β-葡糖基玉米素tZOG、反式-O-β-葡糖基-9-核糖基玉米素tZROG、二氫玉米素DZ、7-β-葡糖基二氫玉米素DZ7G、9-β-葡糖基二氫玉米素DZ9G、O-β-葡糖基二氫玉米素DZOG、O-β-葡糖基-9-核糖基二氫玉米素DZROG		NY/T 2871-2015 水稻中43種植物激素的測定液相色譜-串聯質譜法
褪黑素MT		吳艷迪. 葡萄褪黑素含量變化及其合成基因SNAT原核表達分析
		施龍清,解振興,姜照偉等.水稻褐飛虱若蟲和成蟲褪黑素含量測定及比較
		趙琦,可燕,蔣嘉燁等.不同類型馬齒莧的褪黑素含量測定
油菜素內酯BRs（BL、CS、6DCS、28-HomoBL）		Feifeng Huo, Xin Wang, Yehua Han, Yu Bai, et al. A new derivatization approach for the rapid and sensitive analysis of brassinosteroids by using ultra high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry
1-氨基環丙烷-1-羧酸（ACC）		馬瑩瑩,蓋穎,陳偉奇等.一種用高效液相色譜-電噴霧/串聯質譜(HPLC-ESI/MSn)定量檢測植物組織中微量1-氨基環丙烷-1-羧酸(ACC)含量的方法
乙烯		GH/T 1405-2022 果蔬貯藏過程中乙烯釋放速率的測定氣相色譜法
獨腳金內酯（5-脫氧獨腳金醇、獨腳金醇、Strigolactone GR24）		葉兒翠,丁俊,馮鈺锜.雙層固相萃取-液相色譜/串聯質譜法測定水稻中獨腳金內酯[J].分析科學學報,2017,33(03):297-301.

液相色譜-串聯質譜法

液相色譜-串聯質譜法（Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS）是目前檢測植物內源激素最靈敏、特異且強大的技術之一，其在植物激素檢測中的應用價值主要體現在以下幾個方面：

高靈敏度與特異性：LC-MS/MS能夠檢測到極低濃度（達到pg/mL至fg/mL級別）的植物激素，且由于質譜的高分辨能力和選擇性，能夠有效區分結構相似的激素及其代謝物，減少假陽性結果，提高檢測的準確性。

多目標同時檢測：串聯質譜技術允許在一次分析中同時測定多種植物激素，大大提高了分析效率，這對于研究激素間的相互作用和整體調控機制尤為重要。

樣品適用范圍廣：LC-MS/MS方法適用于各種植物樣本，包括葉片、根、種子、果實等，甚至是微小或難以處理的樣本，如單個細胞或特定組織區域，這為深入研究激素的空間分布和動態變化提供了可能。

定量分析精確：通過內標法或同位素標記標準品，LC-MS/MS能夠實現植物激素的絕對或相對定量，為植物生理學研究、作物改良及環境響應機制分析提供準確的數據支持。

自動化程度高：現代LC-MS/MS系統高度自動化，從進樣、分離、檢測到數據分析都可以自動完成，減少了人為誤差，提高了分析的重現性。

流程概述

樣品收集與保存

·首先，需從植物中收集目標組織或器官，如葉片、根、莖、花或果實。收集后立即冷凍保存，通常在-80°C條件下，以防止內源激素的降解或代謝變化。

樣品前處理

·勻漿與提取：將冷凍樣品進行快速研磨，隨后加入提取溶劑（如甲醇、乙腈或含水的有機溶劑），通過渦旋或超聲波輔助提取內源激素。

·凈化與濃縮：提取液需要通過固相萃取（SPE）或其他凈化技術去除蛋白質、脂質等雜質，隨后濃縮至所需體積，以提高檢測靈敏度。

液相色譜分離

·將處理后的樣品注入液相色譜系統，通過色譜柱（通常為反相柱）進行分離。選擇合適的流動相（如水和有機溶劑的混合物，可能包含酸或緩沖液以調節pH），以優化目標激素的保留時間和分離效率。

質譜檢測

·樣品經色譜分離后，進入串聯質譜儀，首先通過電噴霧電離（ESI）轉化為帶電粒子。

·在第一級質譜（MS1）中，根據m/z比篩選出目標激素的母離子。

·母離子隨后在碰撞室中經歷碰撞誘導解離（CID），生成一系列特征子離子。

·第二級質譜（MS2）檢測這些子離子，通過比較母離子和子離子的m/z比，實現對目標激素的高特異性識別。

數據分析

·使用專業軟件處理質譜數據，基于保留時間和特征離子對匹配，確認激素的種類。

·通過與標準品的響應進行比較，計算出樣品中激素的絕對或相對含量。

結果驗證與報告

·分析結果應通過平行實驗或重復測量進行驗證，確保數據的可靠性和一致性。

·將所有檢測信息整理成報告，包括樣品信息、檢測方法、激素種類、含量及其可能的生理意義。

樣本要求

采集的樣品，均應在短時間內進行分析檢測，如不能及時分析檢測的則需要進行處理和保存，一般應遵循的原則是：環境干燥、溫度較低、避免光照、密封保存。

鮮樣：取樣后立即放入用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管（提前進行編號）并放入液氮速凍，-80℃超低溫冰箱保存，足量干冰郵寄運輸，避免反復凍融。

烘干樣：取樣后用柔軟濕布擦凈，不應用水沖洗。盡快晾干并將樣品置于105?℃的烘箱中烘 15min以終止樣品中酶的活動。經過殺青之后，應立即降低烘箱的溫度，維持在70 ～80℃，直到烘至恒重。若測定樣品中金屬元素的含量，應注意金屬器械的污染問題，以防干擾。

漢廣提供“一站式”檢測服務，您只需要提供樣本原樣，漢廣會嚴格按照國標或行標，進行樣本前處理、指標檢測，數據統計、報告編寫等工作，減少科研工作者的工作量。

取樣前，請與業務經理溝通您的檢測需求，確認樣品類型以及寄樣方式，以免影響檢測數據的真實性，造成時間及成本的損失！

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